Saturs
PCR ir metode, ko zinātnieki izmanto, lai izveidotu miljonus DNS segmenta kopiju. Polimerāzes - proteīna fermenta veids - palīdz radīt jaunus segmentus. Zinātnieki bieži izmanto Taq polimerāzi PCR.
Vēsture
Taq polimerāze nāk no Thermus aquaticus baktērijas, kas dzīvo termiskajos ūdeņos. Kary Mullis un Fred Faloona izstrādāja PCR 1980. gadu vidū, izmantojot sākotnēji Escherichia coli polimerāzi, bet zinātnieki drīz sāka izmantot Taq PCR, jo tas bija izturīgāks pret augstām temperatūrām.
Funkcija
PCR ietver denaturācijas, anulēšanas un replikācijas soļus, parasti atkārtojot 20 līdz 30 reizes. Denaturācija atdala DNS dubultu šķipsniņu atsevišķās daļās. Sadalīšanās posmā primeri saistās ar kopējamiem DNS segmentiem. Taq polimerāze sāk strādāt ar replikācijas posmu: polimerāze no katras atsevišķas DNS virknes, kas iezīmēta ar gruntsgatavu, sāk jaunu dubultu virkni.
Ieguvumi
Augstās temperatūras, kas nepieciešamas, lai denaturētu DNS, iznīcināja sākotnēji PCR izmantoto E. coli polimerāzi, un katram ciklam bija nepieciešams pievienot papildu fermentu. Taq polimerāze var izturēt šīs temperatūras, tāpēc zinātnieki tagad var veikt vairākus PCR ciklus.
Apsvērumi
Taq polimerāzei ir salīdzinoši augsts DNS dubultošanās kļūdu īpatsvars. Citas polimerāzes, kas ir stabilas augstā temperatūrā, ir zemākas kļūdu īpatsvara, bet Taq joprojām ir visbiežāk izmantotā, jo tā ir uzticama un daudzpusīga.