Kā aprēķināt UFC no atšķaidījumiem

Autors: Mark Sanchez
Radīšanas Datums: 4 Janvārī 2021
Atjaunināšanas Datums: 20 Novembris 2024
Anonim
How to Calculate CFU per ml of Bacterial Sample? in 3 Steps || cfu/ml in Microbiology
Video: How to Calculate CFU per ml of Bacterial Sample? in 3 Steps || cfu/ml in Microbiology

Saturs

UFC apzīmē koloniju veidojošās vienības - terminu, ko mikrobioloģijā lieto, lai noteiktu šķīdumā esošo baktēriju skaitu. Atkarībā no parauga koncentrācijas būs jāveic vairāki atšķaidījumi un paraugi jāievieto Petri trauciņos. Ja baktēriju koloniju ir daudz, skaitīšana būs sarežģīta, un, ja to ir maz, paraugs var nebūt reprezentatīvs. Parasti ir ieteicams ievietot sākotnējā šķīduma paraugus uz plāksnēm, vienu 1/10 atšķaidījumu (1 daļa šķīduma un 9 daļas fizioloģiskā šķīduma), vienu 1/100 atšķaidījumu un vienu 1/1000 atšķaidījumu.

Aprēķiniet CFU no baktēriju atšķaidījumiem

1. solis

Veiciet katras plāksnes provizorisku skaitīšanu pēc baktēriju inkubācijas laika, parasti dienu vai divas. Jums jāuzskaita tikai atsevišķas kolonijas, kurām jābūt atsevišķiem izolētiem punktiem, nevis koloniju kopas, kas izaugušas kopā. Izvēlieties plāksni, kurā ir vairāk nekā 30 un mazāk nekā 300 kolonijas.


2. solis

Saskaitiet atsevišķu koloniju skaitu. Tas ir jūsu atšķaidījuma UFC numurs - jums jāveic vienkāršs aprēķins, lai noteiktu UFC no sākotnējā parauga. Šajā piemērā tiks izmantota hipotētiska plāksne, kurā ir 46 kolonijas.

3. solis

Nosakiet izmantotā atšķaidījuma lielumu. Ideālā gadījumā eksperimenta sākumā jums vajadzētu iezīmēt Petri traukus. Šajā piemērā, iespējams, esat sajaucis 1 ml baktēriju kultūras ar 99 ml fizioloģiskā šķīduma. Tas veido 1/100 atšķaidījumu.

4. solis

Reiziniet atšķaidīšanas pakāpi ar daudzumu, ko ieliekat uz plāksnes. Ja šajā piemērā jūs uz agara ievietojat 0,1 ml no 1/100 atšķaidījuma, jums jāreizina 0,1 x 1/100, lai iegūtu rezultātu 1/1000 vai 0,001.

5. solis

Daliet atšķaidījuma UFC numuru (saskaitīto koloniju skaitu) ar 4. solī iegūto rezultātu. Šajā piemērā jūs dalītu 46 ar 1/1000, kas ir tas pats, kas reizināts ar 1000. Rezultāts ir 46000 UFC oriģināls paraugs.